★★★★★    ★★★★★     上海酶研生物    ★★★★★       ★★★★★   

 

elisa 生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。

實驗原理： 
 上海酶研生物試劑盒檢測方法有:雙抗體夾心法、間接法、競爭法
試劑盒組成：

規(guī)格	96t		規(guī)格	48t
試劑盒組成			試劑盒組成
30倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶		20倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶
酶標包被 板	12孔× 8 條		酶標包被 板	12孔×4條
酶標試劑	6ml× 1 瓶		酶標試劑	3ml×1 瓶
樣品稀釋液	6ml× 1 瓶		樣品稀釋液	3ml×1 瓶
顯色劑a 液	6ml× 1 瓶		顯色劑a 液	3ml×1 瓶
顯色劑b 液	6ml× 1/ 瓶		顯色劑b 液	3ml×1/ 瓶
終止液	6ml× 1 瓶		終止液	3ml×1 瓶
標準品	0.5ml× 1 瓶		標準品	0.5ml× 1 瓶
標準品稀釋液	1.5ml× 1 瓶		標準品稀釋液	1.5ml× 1 瓶
說明書	1份		說明書	1份
封板膜	2片（96）		封板膜	2片（48）
密封袋	1個		密封袋	1個

標本要求 
1.血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2.血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇edta、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
5.培養(yǎng)細胞:
檢測細胞內(nèi)的成份時，用pbs（ph7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6.組織標本:
切割標本后，稱取重量。加入一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的pbs（ph7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測含nan3的樣品，因nan3抑制辣根過氧化物酶的（hrp）活性。
操作步驟

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2000pg/ml	5號標準品	150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
1000pg/ml	4號標準品	150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
500pg/ml	3號標準品	150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
250pg/ml	2號標準品	150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
125pg/ml	1號標準品	150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

溫育：操作同3。

洗滌：操作同5。

顯色：每孔先加入顯色劑a50μl，再加入顯色劑b50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（od值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

操作程序總結(jié)：
計算
  以標準物的濃度為橫坐標，od值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的od值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與od值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的od值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本od值大于標準品孔第一孔的od值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。 
保存條件及有效期 
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
本說明書48t同樣適用 
上海酶研生物elisa試劑盒特點體現(xiàn)： 
       一、高效、靈敏、特異---采用全進口材料和抗體
  二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性---領(lǐng)先的科技水平
  三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體---嚴格的生產(chǎn)流程和規(guī)范操作
酶研生物elisa試劑盒適用范圍： 
一．適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
二．可檢測動物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等
三．可檢測指標齊全：白介素，干擾素，血管緊張素，肺炎衣原體，趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標
酶研生物elisa試劑盒免費代測服務(wù)： 
1.每個指標需提供100微升樣品，如做復(fù)孔則200微升
 
2、標本離心處理后請使用泡沫箱加冰袋郵寄至我司；
 
2、樣本在一周內(nèi)使用，保存條件2-8度；
 
3、代測服務(wù)只反饋實驗結(jié)果原數(shù)據(jù)信息，不再提供相應(yīng)試劑盒；
 
4、需支付相應(yīng)試劑盒費用，代測不產(chǎn)生任何費用；
上海酶研生物科技有限公司坐落于上海閔行高科技園區(qū)，現(xiàn)擁有來自人、小鼠、大鼠、兔、豬等種屬的試劑盒5000余種，還可根據(jù)客戶要求定做試劑盒，提供免費代測服務(wù)。質(zhì)量好，使我們擁有源源不斷的客戶；價格低，薄利多銷是我們生存的優(yōu)勢?；服務(wù)好，讓我們在業(yè)界擁有很好的口碑。我們將一如既往堅持質(zhì)量第一，誠信為本的理念。 ?感謝新老客戶的博愛！！ 
 
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凡購買本公司試劑盒有非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換